western blot

pour les eleves en BCPST, et les autres
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western blot

Message par vetolama2 » 07 oct. 2013 23:10

Bonjour, je révise les techniques d'études et de séparation des protéiens et j'aimerais savoir quels sont les avantages et les limites du western blot.

Pour les avantages, je pense qu'il permet de donner la masse moléculaire de la protéine mais c'est un peu léger.

Merci de bien vouloir m'expliquer

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Re: western blot

Message par heavenhel » 08 oct. 2013 15:17

Tu n'as pas besoin de faire un Western Blot pour connaître la masse moléculaire d'une protéine. Une bête électrophorèse en condition dénaturante suffit.

Comment ça marche un Western ? Quelle est la fonction de chaque étape ?

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Re: western blot

Message par vetolama2 » 08 oct. 2013 18:26

c'est un transfert de protéines sur une membrane permettant leur détection et détermination.

Je ne vois pas tellement la différence entre électrophorèse et western blot et surtout ces avantages ou limites

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Re: western blot

Message par Freija » 09 oct. 2013 17:04

Le WB est plus spécifique que l'electrophorèse, mais essaye de trouver pourquoi.
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Re: western blot

Message par vetolama2 » 09 oct. 2013 17:55

je dirai qu'il est plus spécifique car il nous montre la présence de ocmplexe anticorps antigène alors qu'une électrophorèse nous donne seulement la migration des protéines en fonction de la longueur de leur chaine polypeptidique

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Re: western blot

Message par Freija » 29 oct. 2013 15:06

Je réponds sans doute un peu tard, mais en fait, le Western a une étape de plus par rapport à une simple électrophorèse : tu fais une reconnaissance spécifique des protéines recherchées avec des anticorps dirigés contre ces protéines. Pour une simple electrophorèse, seule la taille des bandes te permet de déterminer que ta protéine est présente, c'est donc un peu moins spécifique.
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